Phim mở đầu với cảnh Hiền vô tình bị vạ lây vào sự truy đuổi của bọn giang hồ. Trước đó, Hiền và Nga vốn là hai người bạn thân, vì hoàn cảnh đơn thân nên Hiền đến tá túc nhà bạn. Do chồng của Nga liên quan đến việc chiếm đoạt tiền của băng nhóm nên bị bọn chúng vây bắt. Lúc này, cả Nga và Hiền đều đang bụng mang dạ chửa nên trên đường chạy trốn đã trở dạ.
Sau đó, Nga tỉnh lại và vô cùng đau khổ khi biết Hiền đã qua đời. Lúc này, băng nhóm giang hồ đã lần theo dấu vết và tìm đến phòng sinh. Tháo bỏ chiếc vòng tay của hai đứa bé, cả bọn còn phóng hỏa đốt phòng sinh. Nga kịp thời mang được hai đứa bé ra ngoài nhưng không biết được đứa trẻ nào là con mình.
Trong sự hỗn loạn, một y tá cho rằng, đứa bé có vết chàm trên tay là con của Nga. Nhờ sự giúp đỡ của một người quen, Nga đưa được hai đứa trẻ về với mẹ của cô cùng mảnh giấy ghi rõ "Đứa có vết chàm trên tay là con của con". Tuy nhiên, tờ giấy đã bị thất lạc khi người quen của Nga cố gắng thoát khỏi sự truy đuổi của băng nhóm này. Phần Nga đã bị bọn giang hồ bắt được.
Hai mươi lăm năm sau, 2 đứa trẻ ngày nào giờ đã trưởng thành trong thân phận "anh em sinh đôi" với tên Nhân - Nghĩa (Thanh Duy & Thanh Thức). Bà Sáu (NSƯT Phi Điểu) - mẹ của Nga - đã dưỡng nuôi hai đứa cháu trong nghèo khó bằng tất cả tình yêu thương của mình.
Bà Sáu thừa biết rằng, chỉ 1 trong 2 đứa là cháu ruột của bà, con ruột của Nga nhưng phần thì không thể xác định được chắc chắn, phần thì muốn 2 cháu không có sự phân biệt với nhau nên bà Sáu tạo cho Nhân và Nghĩa danh phận anh em sinh đôi rồi hết lòng nuôi nấng.
Trưởng thành trong nghèo khó nhưng Nhân thông minh, học giỏi và nhanh chóng tạo được uy tín ở công ty bất động sản Lê Gia. Với Nghĩa, vì hiểu gia cảnh nhà mình và không muốn bà ngoại nặng gánh đã chủ động nhường cơ hội vào đại học cho anh Hai, còn mình làm công cho một xưởng mộc gần nhà.
Trong một lần mang USB đến công ty đưa cho Nhân, Nghĩa tình cờ nhìn thấy một cô gái xinh xắn (Phương Hằng) có nghĩa cử tốt đẹp với một bà cụ nên dành cho cô nhiều thiện cảm. Tuy nhiên, cái nhìn của anh khiến cô hiểu lầm và ác cảm với Nghĩa…
“Thử thách cuộc đời” sẽ lên sóng vào lúc 20 giờ các buổi tối từ thứ Hai đến thứ Bảy trên THVL1.
